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1、细胞形态与生长情况

hiPSC/hESC 培养基-ncEpic 连续培养的hiPSC(P20)细胞形态图示。
图A、B、C、D分别为培养第1、2、3、4天时,显微镜下hiPSC的形态图示。标尺:200μm。

2、细胞形态与生长情况

Nuwacell™-VTN包被蛋白连续培养的hiPSC(P20)细胞形态图示。
图示别为培养第1、2、3天时,显微镜下hiPSC的形态图示,使用Nuwacell™ hiPSC/hESC 培养基-ncEpic培养。标尺:200μm。


3、细胞形态与生长情况

Nuwacell™ hiPSC/hESC高效冻存液保存的hiPSC(P13)复苏后细胞形态图示。

图示分别为细胞复苏第1、2、3天时,显微镜下hiPSC的形态图示,使用Nuwacell™ hiPSC/hESC 培养基-ncEpic培养。标尺:200μm。

4、电转液效果对比图片

图A-图B:Nuwacell™ hPSC细胞电转液不加入质粒18小时后细胞显微镜下图示标尺:200μm

图C-图D:Nuwacell™ hPSC细胞电转液加入质粒18小时细胞显微镜下图示。标尺:200μm

5、电转液效果对比图片

图A-图B:Nuwacell™ hMSC细胞电转液不加入质粒24小时后细胞显微镜下图示。标尺:200μm

图C-图D:Nuwacell™hMSC细胞电转液加入质粒24小时后细胞显微镜下图示。标尺:200μm

6、细胞形态与生长情况

Nuwacell™ 科研级hiPSC细胞株连续生长形态图示。

图示分别为培养第1、2、3天时显微镜下hiPSC的形态图示。A:RC01001-A;B:RC01001-B。标尺:200μm。

7、细胞表面标志物检测

Nuwacell™  科研级hiPSC 细胞株A:RC01001-A;B:RC01001-B)表面标志物检测结果。

上图为流式细胞分析结果,其中浅灰色线条为同种抗体阴性对照,黑线为hiPSC细胞表面标志物抗体。


8、多能基因检测

Nuwacell™  科研级 hiPSC 细胞株( A:RC01001-A;B:RC01001-B)的多能性基因检测。

上图为qRT-PCR分析结果,OCT4与NANOG为细胞多能基因。



9、基因组稳定性检测

Nuwacell™ 科研级hiPSC 细胞株( A:RC01001-A;B:RC01001-B的基因组稳定性检测。

RC01001-A:46,XY;RC01001-B:46,XX。结果解释:G显带,计数20个分裂相,核型分析5个,未发现染色体数目或结构异常。


10、分化潜能检测

Nuwacell™  科研级hiPSC 细胞株 A:RC01001-A;B:RC01001-B) 在免疫缺陷小鼠体内形成畸胎瘤。

外:外胚层神经组织)、软中:中胚层(软骨组织)、内:内胚层肠上皮组织),成瘤时间7周。标尺:200μm.


11、Blebbistatin传代hPSC细胞图片

终浓度2.5μM的Blebbistatin传代hiPSC(P18)形态图片,使用Nuwacell™ hiPSC/hESC 培养基-ncEpic培养。
图示分别为培养第1、2、3天时,显微镜下hiPSC形态图示。标尺:200μm。







12、Nuwacell™ hPSC Dissociation Buffer 消化 hPSC 示例

Nuwacell™  hPSC Dissociation Buffer 消化 hPSC 示例图片

(A)EDTA 消化4min;(B)EDTA 消化6min;(C)EDTA 消化8min。标尺:200μm


13、原代hMSC分离培养

Nuwacell™ ncMission hMSC Medium分离培养的脐带来源hMSC细胞DAY 12形态图示。 

图示分别为形成的不同大小hMSC克隆,0.5g脐带华通氏胶组织/T75培养瓶。标尺:200μm。

Nuwacell™ ncMission hMSC Medium与对照培养基Commericial A分离培养脐带hMSC对比图示。

0.5g脐带华通氏胶组织/T75培养瓶,统计Day12生成克隆数(A)、收获细胞总量(B)和克隆出现时间(C)

ncMission hMSC Medium原代分离培养hMSC效果显著优于Commericial A。

14、细胞形态与生长情况

连续培养的NuwacellhiPSC-EGFP细胞株细胞形态图示。荧光倒置显微镜图示。

图A、B为正常传代DAY 3(P30)细胞图示,C、D为单细胞传代DAY 8(P30)细胞图示。标尺:200μm。

15、细胞GFP阳性率检测

连续培养的NuwacellhiPSC-EGFP细胞株GFP阳性率检测,GFP阳性率>90%。

EGFP-1为正常传代DAY 3(P30)细胞,EGFP-1为单细胞传代DAY 8(P30)细胞。

上图为流式细胞分析结果,浅灰色线条为hiPSC阴性对照;黑线为GFP-hiPSC的GFP阳性率结果。 

16、细胞表面标志物检测

NuwacellhiPSC-EGFP细胞株(P30)细胞表面标志物检测结果。

上图为流式细胞分析结果,其中浅灰色线条为同种抗体阴性对照,黑线为hiPSC细胞表面标志物抗体。 

17、细胞多能基因检测

NuwacellhiPSC-EGFP细胞株(P30)细胞多能基因检测结果。

上图为qRT-PCR分析结果,POU5F1与NANOG为细胞多能基因。 

18、细胞染色体核型检测

NuwacellhiPSC-EGFP细胞株(P30)细胞核型检测结果46,XY。

结果解释:G显带,计数20个分裂相,核型分析5个,未发现染色体数目或结构异常。 

19、细胞分化潜能检测

NuwacellhiPSC-EGFP细胞株(P30)细胞在免疫缺陷小鼠体内形成畸胎瘤。标尺:100μm。

E、F、G分别为神经组织(外胚层)、软骨组织(中胚层)、肠上皮组织(内胚层),成瘤时间8周。 

20、细胞形态与生长情况

连续传代培养的Nuwacell™ 原代hMSC细胞P3、P4、P5代DAY 3形态图示。
接种密度6000/cm2,0.2 mL/cm2培养基用量,T25培养瓶连续培养3天。标尺:200μm 。


21、原代hMSC细胞表面抗体检测

连续培养的原代hMSC细胞(P5)表面标志物检测:

CD73 + / CD90 + / CD105 +,CD14-/ CD34- / CD45- / CD79α-/ HLA-DR-。

(上图为流式细胞分析结果,浅灰色线条为同种抗体阴性对照,黑线为MSC细胞表面标志物抗体) 



22、原代hMSC细胞三系分化验证

连续培养的原代hMSC细胞(p5)三系分化功能实验。

A:脂肪分化(油红染色法)B:硬骨分化(茜素红染色法)C:软骨分化(阿利新兰染色法)。 标尺:100μm。 


23、分化详细流程图

Nuwacell™ hPSC-间充质干细胞分化试剂盒分化流程图。


24、分化过程中细胞形态图示

Nuwacell™ hPSC-间充质干细胞分化试剂盒分化过程中细胞形态图示。

图示分别为分化过程中DAY 1、3、8、14时的细胞形态。标尺:200μm。




25、hPSC来源MSC细胞形态图示

Nuwacell™ hPSC-间充质干细胞分化试剂盒分化的MSC细胞形态图示。

图示分别为hPSC-MSC生长到P1、P3、P6代的细胞形态(汇合度80-85%)。标尺:200μm。



26、hPSC来源MSC细胞表面抗体检测

连续培养的hPSC-MSC(P3)细胞表面标志物检测:

CD73 + / CD90 + / CD105 +,CD14-/ CD34- / CD45- / CD79α-/ HLA-DR-。

(上图为流式细胞分析结果,浅灰色线条为同种抗体阴性对照,黑线为MSC细胞表面标志物抗体)


27、hPSC来源MSC细胞三系分化潜能检测

连续培养的hPSC-MSC(P3)细胞三系分化功能实验。

A:脂肪分化(油红染色法)B:硬骨分化(茜素红染色法)C:软骨分化(阿利新兰染色法)。标尺:200μm。

28、分化详细流程图

Nuwacell™  hPSC-RPE分化试剂盒分化流程图。

29、分化过程中细胞形态图示

Nuwacell™ hPSC-RPE分化试剂盒分化过程中细胞形态图示。

A:DAY 0(hPSC);  B:DAY 6(RPE progenitors);C:DAY 16(Immature RPE);  D:DAY45(Mature RPE)。标尺:200μm。


30、hPSC来源RPE细胞特异性标志物检测

Nuwacell™ hPSC-RPE分化试剂盒分化的RPE细胞(DAY 45)。

细胞特异性标志物(ZO-1/MiTF)检测结果(免疫荧光染色)。标尺:200μm。


Nuwacell™  hPSC-RPE分化试剂盒分化的RPE(DAY 45)细胞特异性标志物检测。

ZO-1/MiTF/RPE65/BEST1/MERTK/PEDF是成熟RPE细胞的特异性标志物;E:流式细胞法检测;F:RT-qPCR检测。

31、分化详细流程图

Nuwacell™hPSC-类肾器官分化试剂盒分化流程图。


32、分化DAY 0-8细胞形态图示

Nuwacell™  hPSC-类肾器官分化试剂盒分化过程中细胞形态图示。

图示分别为分化第0、4、6、8天时的细胞形态图示。标尺:200μm。

33、2D分化DAY 8-20细胞形态图示

Nuwacell™  hPSC-类肾器官分化试剂盒2D分化过程中细胞形态图示。

图A、B分别为为2D分化第14、20天时的细胞形态图示,图C为2D分化第20天时的放大细胞形态图示。标尺:200μm。


34、3D分化DAY 8-17细胞形态图示

Nuwacell™  hPSC-类肾器官分化试剂盒3D分化过程中细胞形态图示。

图D为3D分化第13天时的细胞形态图示,图E、F为3D分化第17天时的细胞形态图示。标尺:200μm。

35、hPSC来源肾上皮细胞特异性标志物表达检测

hPSC来源类肾器官(2D分化,DAY 20)特异性标志物表达检测(免疫荧光染色)图示。

PODXL、CDH1、LTL、PAX8分别为足细胞、远端小管、近端小管、肾囊特异性标志物(激光扫描共聚焦显微镜)。标尺:50μm。


36、分化详细流程图

Nuwacell™ hPSC-运动神经元分化试剂盒分化流程图。 




37、分化过程中细胞形态图示

Nuwacell™ hPSC-运动神经元分化试剂盒分化过程中细胞形态图示。

图A、B、C、D分别为分化第4、9、12、30天时的细胞形态图示。标尺:200μm。

38、hPSC来源运动神经元分化过程中细胞检测

hPSC来源运动神经元分化到DAY 9(MNP)时细胞特异性标志物检测结果。

Olig2,Tubulin是MNP细胞的特异性标志物,免疫荧光染色图示。标尺:50μm。

hPSC来源运动神经元分化到DAY 35时(mMN,成熟运动神经元)细胞特异性标志物检测结果。

CHAT,βⅢ-Tubulin是mMN的特异性标志物,免疫荧光染色图示。标尺:50μm。


39、hPSC来源运动神经元分化过程中特异性标志物检测

A:hPSC来源运动神经元分化过程中MNP(DAY 0-9)特异性标志物(PAX6、OLIG2)检测结果

B:hPSC来源运动神经元分化过程中pMN(DAY 9-12)特异性标志物(ISL1、HB9)检测结果。

C:hPSC来源运动神经元分化过程中mMN(DAY 15-40)特异性标志物(CHAT、MAP2、Synapyophysin)检测结果。


40、hPSC来源成熟运动神经元膜片钳电生理检测

hPSC来源成熟运动神经元(DAY 30)膜片钳电生理检测结果。

选取符合形态特征的神经元进行膜片钳测试,可检测到自发放电。标尺:50μm。



41、分化详细流程图

Nuwacell™ hPSC-多巴胺能神经前体细胞分化试剂盒分化流程图。

42、分化过程中细胞形态图示

Nuwacell™  hPSC-多巴胺能神经元分化试剂盒分化过程中细胞形态图示。

图示为DAY  0启动分化时的hPSC,DAY  11收获的mDAP(多巴胺能神经前体细胞),

DAY 12维持培养的mDAP,DAY 45的mDAN(成熟多巴胺能神经元)。标尺:200μm。



43、hPSC来源多巴胺能前体细胞(mDAP)特异性标志物检测

Nuwacell™ hPSC-多巴胺能神经前体细胞分化试剂盒分化的mDAP细胞荧光图示。

Lmx1a,Foxa2,En1为mDAP的特异性标志物,免疫荧光染色检测。标尺:200μm。


Nuwacell™  hPSC-多巴胺能神经前体细胞分化试剂盒分化的mDAPs特异性标志物检测。

图A为RT-qPCR检测;图B为流式细胞法检测。NKX2.1、DBX1为前脑标志物;Lmx1a、Foxa2、En1、OTX2为中脑标志物,GBX2为后脑标志物。


44、hPSC来源成熟多巴胺能神经元(mDAN)特异性标志物和功能检测

hPSC来源的成熟中脑多巴胺能神经元(mDAN,DAY 40)细胞荧光图示。

TH和Nurr1为成熟mDAN的细胞特异性标志物,免疫荧光染色检测。标尺:200μm。

hPSC来源的成熟中脑多巴胺能神经元(mDAN,DAY 45)多巴胺释放水平检测结果。 

对照组为hPSC细胞,正常细胞多巴胺释放为0-100pg/mL,放射性免疫法检测。 

45、细胞形态与生长情况

Nuwacell™ 间充质干细胞冻存液保存的hMSC复苏后形态图示。
图A、B、C分别为P3代培养第1、2天、3天的hMSC形态图示。标尺:200μm。

46、细胞形态图示

连续培养的Nuwacell™ hPSC-间充质干细胞(P5)形态图示。 
图示分别为hPSC-MSC生长到DAY 1、DAY 2、DAY 3时的细胞形态图示。标尺:200μm 。

47、细胞表面标志物检测

连续培养的Nuwacell™ hPSC-间充质干细胞(P5)表面标志物检测:

CD73 + / CD90 + / CD105 +,CD14-/ CD34- / CD45- / CD79α-/ HLA-DR-。

(上图为流式细胞分析结果,浅灰色线条为同种抗体阴性对照,黑线为MSC细胞表面标志物抗体)

48、细胞三系分化功能检测

连续培养的Nuwacell™ hPSC-间充质干细胞(P5)三系分化功能实验。 

A:脂肪分化(油红染色法)B:硬骨分化(茜素红染色法)C:软骨分化(阿利新兰染色法)。标尺:200μm。

49、hPSC-运动神经元前体细胞复苏培养形态图示

Nuwacell™ hPSC-运动神经元前体细胞复苏后DAY 1-DAY 21细胞形态图示。标尺:200μm 。

50、hPSC-多巴胺能神经前体细胞复苏培养形态图示

Nuwacell™  hPSC-多巴胺能神经前体细胞复苏、维持培养与成熟分化形态图示。
图A、B、C分别为hPSC-多巴胺能神经前体细胞(mDAP)复苏DAY 1、DAY 2和DAY 4细胞形态图示;
图D、E、F分别为mDAP分化为成熟多巴胺能神经元(mDAN)过程的DAY 1、DAY 9和DAY 30细胞形态图示。 标尺:200μm。

51、hPSC-多巴胺能神经前体细胞特异性标志物检测

Nuwacell™ hPSC-多巴胺能神经前体细胞(mDAP)荧光图示。

Lmx1a,Foxa2,En1为mDAPs细胞的特异性标志物,免疫荧光染色检测。标尺:200μm。

52、成熟多巴胺能神经元(mDAN)特异性标志物和功能检测

Nuwacell™ hPSC-多巴胺能神经前体细胞分化为成熟的中脑多巴胺能神经元(mDAN,复苏后DAY 25)细胞荧光图示。

TH和Nurr1为成熟多巴胺能神经元(mDAN)的特异性标志物,免疫荧光染色检测。标尺:200μm。 

53、hPSC-肾元祖细胞形态图示

Nuwacell™  hPSC-肾元细胞复苏及继续分化DAY 2-DAY 12的细胞形态图示。标尺:200μm。 

54、hPSC-肾元祖细胞分化潜能检测

Nuwacell™ hPSC-肾元祖细胞2D分化类肾器管特异性标志物检测荧光染色图示。

PODXL、CDH1、LTL分别为足细胞、远端小管、近端小管特异性标志物(倒置荧光显微镜)。标尺:100μm。

55、hPSC-RPE细胞形态图示

Nuwacell™  hPSC-RPE细胞复苏后DAY1-DAY15细胞形态图示。
DAY8时可见典型RPE细胞形态,DAY10开始可见明显黑色素分泌。标尺:200μm。

56、hPSC-RPE细胞特异性标志物检测

Nuwacell™ hPSC-RPE细胞(复苏后DAY 20)细胞特异性标志物(ZO-1/MiTF)检测结果(免疫荧光染色)。标尺:200μm。

57、细胞传代培养

Nuwacell™ ncMission hMSC Medium连续传代培养的P3、P4、P5代hMSC细胞DAY 3形态图示。

接种密度6000/cm2,0.2 mL/cm2培养基用量,T25培养瓶连续培养3天。标尺:200μm 。



Nuwacell™ ncMission hMSC Medium与对照培养基Commericial A连续培养hMSC对比图示。

接种密度6000/cm2,0.2 mL/cm2培养基用量,T25培养瓶连续培养3天。细胞倍增曲线(D)和倍增时间(E)对比。

ncMission hMSC Medium连续传代培养hMSC效果显著优于Commericial A。

58、细胞形态图示

连续培养的Nuwacell™ hPSC-间充质干细胞(P5)形态图示。 
图示分别为hPSC-MSC生长到DAY 1、DAY 2、DAY 3时的细胞形态图示。标尺:200μm 。


59、细胞表面标志物检测

连续培养的Nuwacell™ hPSC-间充质干细胞(P5)表面标志物检测:

CD73 + / CD90 + / CD105 +,CD14-/ CD34- / CD45- / CD79α-/ HLA-DR-。

(上图为流式细胞分析结果,浅灰色线条为同种抗体阴性对照,黑线为MSC细胞表面标志物抗体)

60、细胞三系分化功能检测

连续培养的Nuwacell™ hPSC-间充质干细胞(P5)三系分化功能实验。

A:脂肪分化(油红染色法)B:硬骨分化(茜素红染色法)C:软骨分化(阿利新兰染色法)。标尺:200μm。

61、细胞表面标志物检测

Nuwacell™ ncMission hMSC Medium连续培养的hMSC细胞(P5)表面标志物检测:

CD73 + / CD90 + / CD105 +,CD14-/ CD34- / CD45- / CD79α-/ HLA-DR-。

(上图为流式细胞分析结果,浅灰色线条为同种抗体阴性对照,黑线为MSC细胞表面标志物抗体) 



62、医疗器械注册备案信息

Nuwacell™ 间充质干细胞冻存液获得第一类医疗器械注册备案资质(备案号:皖合械备20180042号)。

63、细胞形态与生长情况

hiPSC/hESC 培养基-ncTarget 连续培养的hiPSC(P20)细胞形态图示。
图A、B、C分别为培养第2、3、4天时hiPSC的形态图示,D为培养至第4天时的放大细胞图示。标尺:200μm。

64、单细胞传代图片

hiPSC/hESC 培养基-ncTarget 连续培养的hiPSC(P20)单细胞传代图示。

图E、F、G分别为培养第3、5、7天时,显微镜下hiPSC的形态图示。标尺:200μm。

65、细胞表面标志物检测

hiPSC/hESC 培养基-ncTarget 连续培养的hiPSC(P20)细胞表面标志物检测。
上图为流式细胞分析结果,浅灰色线条为同种抗体阴性对照,黑线为hiPSC细胞表面标志物抗体。

66、多能基因检测

hiPSC/hESC 培养基-ncTarget 连续培养的hiPSC(P20)多能性基因检测结果。
上图为qRT-PCR分析结果,POU5F1与NANOG为细胞多能基因。

67、基因组稳定性检测

hiPSC/hESC 培养基-ncTarget 连续培养的hiPSC(P20)基因组稳定性检测。

核型:46,XY,分辨率:400带。结果解释:G显带,计数20个分裂相,核型分析5个,未发现染色体数目或结构异常。



68、hMSC三系分化鉴定

Nuwacell™ ncMission hMSC Medium连续培养的hMSC细胞(P5)三系分化鉴定:

F:脂肪分化(油红染色法);G:硬骨分化(茜素红染色法);H:软骨分化(阿利新兰染色法)。标尺:200μm 。

hPSC来源的成熟中脑多巴胺能神经元(mDAN,DAY 42)膜片钳测试结果。

选取符合形态特征的mDA进行膜片钳测试,可检测到较稳定的2-10Hz的节律性自发放电;

在电压钳模式下,给以超极化电压可见缓慢增大的内向电流(H电流)。标尺:20μm。

69、细胞核型检测

连续培养的Nuwacell™ hPSC-间充质干细胞(P5)染色体核型检测。核型:46,XX,分辨率:400带。
结果解释:G显带,计数20个分裂相,核型分析5个,未发现染色体数目或结构异常。

70、细胞核型检测

连续培养的Nuwacell™ hPSC-间充质干细胞(P5)染色体核型检测。核型:46,XX,分辨率:400带。
结果解释:G显带,计数20个分裂相,核型分析5个,未发现染色体数目或结构异常。

71、分化详细流程图

Nuwacell™ hPSC-间充质干细胞分化试剂盒分化流程图。


72、分化详细流程图

Nuwacell™ hPSC-多巴胺能神经前体细胞分化试剂盒分化流程图。

73、分化详细流程图

Nuwacell™ hPSC-运动神经元分化试剂盒分化流程图。 

74、分化详细流程图

Nuwacell™hPSC-类肾器官分化试剂盒分化流程图。


75、分化详细流程图

Nuwacell™  hPSC-RPE分化试剂盒分化流程图。

76、分化过程中细胞形态图示

Nuwacell™  hPSC-多巴胺能神经元分化试剂盒分化过程中细胞形态图示。

图示为DAY  0启动分化时的hPSC,DAY  11收获的mDAP(多巴胺能神经前体细胞),

DAY 12维持培养的mDAP,DAY 45的mDAN(成熟多巴胺能神经元)。标尺:200μm。

77、hPSC来源多巴胺能前体细胞(mDAP)特异性标志物检测

Nuwacell™ hPSC-多巴胺能神经前体细胞分化试剂盒分化的mDAP细胞荧光图示。

Lmx1a,Foxa2,En1为mDAP的特异性标志物,免疫荧光染色检测。标尺:200μm。

Nuwacell™  hPSC-多巴胺能神经前体细胞分化试剂盒分化的mDAPs特异性标志物检测。

图A为RT-qPCR检测;图B为流式细胞法检测。NKX2.1、DBX1为前脑标志物;Lmx1a、Foxa2、En1、OTX2为中脑标志物,GBX2为后脑标志物。


78、hPSC来源成熟多巴胺能神经元(mDAN)特异性标志物和功能检测

hPSC来源的成熟中脑多巴胺能神经元(mDAN,DAY 40)细胞荧光图示。

TH和Nurr1为成熟mDAN的细胞特异性标志物,免疫荧光染色检测。标尺:200μm。

hPSC来源的成熟中脑多巴胺能神经元(mDAN,DAY 45)多巴胺释放水平检测结果。 

对照组为hPSC细胞,正常细胞多巴胺释放为0-100pg/mL,放射性免疫法检测。 

Nuwacell™ hPSC-多巴胺能神经前体细胞分化为成熟的中脑多巴胺能神经元(mDAN,DAY 45)的膜片钳测试结果。
选取符合形态特征的mDAN进行膜片钳测试,可检测到较稳定的2-10Hz的节律性自发放电。标尺:20μm。

79、分化过程中细胞形态图示

Nuwacell™ hPSC-运动神经元分化试剂盒分化过程中细胞形态图示。

图A、B、C、D分别为分化第4、9、12、30天时的细胞形态图示。标尺:200μm。

80、hPSC来源运动神经元分化过程中细胞检测

hPSC来源运动神经元分化到DAY 9(MNP)时细胞特异性标志物检测结果。

Olig2,Tubulin是MNP细胞的特异性标志物,免疫荧光染色图示。标尺:50μm。

hPSC来源运动神经元分化到DAY 35时(mMN,成熟运动神经元)细胞特异性标志物检测结果。

CHAT,βⅢ-Tubulin是mMN的特异性标志物,免疫荧光染色图示。标尺:50μm。

81、hPSC来源运动神经元分化过程中特异性标志物检测

A:hPSC来源运动神经元分化过程中MNP(DAY 0-9)特异性标志物(PAX6、OLIG2)检测结果

B:hPSC来源运动神经元分化过程中pMN(DAY 9-12)特异性标志物(ISL1、HB9)检测结果。

C:hPSC来源运动神经元分化过程中mMN(DAY 15-40)特异性标志物(CHAT、MAP2、Synapyophysin)检测结果。

82、hPSC来源成熟运动神经元膜片钳电生理检测

hPSC来源成熟运动神经元(DAY 30)膜片钳电生理检测结果。

选取符合形态特征的神经元进行膜片钳测试,可检测到自发放电。标尺:50μm。

83、分化DAY 0-8细胞形态图示

Nuwacell™  hPSC-类肾器官分化试剂盒分化过程中细胞形态图示。

图示分别为分化第0、4、6、8天时的细胞形态图示。标尺:200μm。

84、2D分化DAY 8-20细胞形态图示

Nuwacell™  hPSC-类肾器官分化试剂盒2D分化过程中细胞形态图示。

图A、B分别为为2D分化第14、20天时的细胞形态图示,图C为2D分化第20天时的放大细胞形态图示。标尺:200μm。

85、3D分化DAY 8-17细胞形态图示

Nuwacell™  hPSC-类肾器官分化试剂盒3D分化过程中细胞形态图示。

图D为3D分化第13天时的细胞形态图示,图E、F为3D分化第17天时的细胞形态图示。标尺:200μm。

86、hPSC来源肾上皮细胞特异性标志物表达检测

hPSC来源类肾器官(2D分化,DAY 20)特异性标志物表达检测(免疫荧光染色)图示。

PODXL、CDH1、LTL分别为足细胞、远端小管、近端小管特异性标志物(倒置荧光显微镜)。标尺:100μm。


87、分化过程中细胞形态图示

Nuwacell™ hPSC-RPE分化试剂盒分化过程中细胞形态图示。

A:DAY 0(hPSC);  B:DAY 6(RPE progenitors);C:DAY 16(Immature RPE);  D:DAY45(Mature RPE)。标尺:200μm。

88、hPSC来源RPE细胞特异性标志物检测

Nuwacell™ hPSC-RPE分化试剂盒分化的RPE细胞(DAY 45)。

细胞特异性标志物(ZO-1/MiTF)检测结果(免疫荧光染色)。标尺:200μm。


Nuwacell™  hPSC-RPE分化试剂盒分化的RPE(DAY 45)细胞特异性标志物检测。

ZO-1/MiTF/RPE65/BEST1/MERTK/PEDF是成熟RPE细胞的特异性标志物;E:流式细胞法检测;F:RT-qPCR检测。

89、支持hPSC细胞生长图示

Nuwacell™ ncLaminin511E8F铺底的hiPSC/hESC 培养基-ncEpic 连续培养的hiPSC(P30,DAY8)单细胞传代图示。标尺:200μm。

90、ncB27无血清添加剂支持神经细胞生长

Nuwacell™ ncB27无血清添加剂支持培养的hPSC-多巴胺能神经前体细胞(mDAP)形态图示。
上图分别为hPSC-mDAP生长DAY1、2、3、5细胞形态图示。标尺:200μm。

Nuwacell™ ncB27无血清添加剂支持培养的hPSC-多巴胺能神经前体细胞(mDAP,DAY4)荧光图示。
Lmx1a,Foxa2为mDAP的特异性标志物,免疫荧光染色检测。标尺:200μm。

91、分化详细流程图

Nuwacell™ hPSC-微血管内皮细胞分化流程图。

92、hPSC-血管内皮细胞形态图示

hPSC分化的微血管内皮细胞(EC,P2)形态图示。
图示分别为hPSC-EC生长DAY1、2、3细胞形态图示。标尺:200μm。

93、hPSC-血管内皮细胞特异性标志物检测

hPSC分化的微血管内皮细胞(EC,P2)免疫荧光染色图示。
UEA-1和CD31为微血管内皮细胞特异性标志物。标尺:200μm。

hPSC分化的微血管内皮细胞(EC,P2)免疫荧光染色图示。
hPSC-血管内皮细胞表达VE-cadherin(血管内皮钙粘蛋白)而不表达α-SMA(α-平滑肌肌动蛋白)。标尺:200μm。

hPSC分化的微血管内皮细胞(EC,P2)特异性标志物检测。
CD31和CD144是血管内皮细胞的特异性标志物,流式细胞法检测。标尺:200μm。

94、文献引用

96、hiPSC电转效果示例

Nuwacell™ hiPSC/hESC高效电转液转染hiPSC示例:

把2μg表达EGFP的pPBmPNEE的质粒 (~6.5kb)电转入hiPSC,转染后24小时使用流式细胞仪检测EGFP阳性细胞。

A:电转时未加入质粒的阴性对照;B:电转时加入pPBmPNEE质粒。转染效率可达85.43%。




97、产品效果示例

使用Nuwacell™ hiPSC/hESC高效电转液转染制备的Nuwacell™ hiPSC-Luc-GFP细胞株细胞形态图示。
图C、D为hiPSC-Luc-GFP(P32)培养DAY 3细胞图示。标尺:100μm。

98、单细胞传代图片

hiPSC/hESC 培养基-ncEpic 连续培养的hiPSC(P20)单细胞传代图示。

图A、B、C分别为培养第1、5、10天时,显微镜下hiPSC的形态图示。标尺:200μm。

99、原代hMSC细胞核型检测

连续培养的原代hMSC细胞(P5)染色体核型检测。核型:46,XY,分辨率:400带。
结果解释:G显带,计数20个分裂相,核型分析5个,未发现染色体数目或结构异常。


100、hPSC-运动神经元前体细胞荧光染色图示

Nuwacell™ hPSC-运动神经元前体细胞(MNP)特异性标志物检测结果。
Olig2,Tubulin是MNP的细胞特异性标志物,免疫荧光染色图示。标尺:50μm。 

101、重编程hiPSC克隆形成图示

外周血重编程-hiPSC克隆形成阶段细胞形态图示。

中盛溯源在重编程建系上有着丰厚的经验和技术实力,每次重编程可获得上百个细胞克隆;

如上图所示一个视野下拥有10个hiPSC克隆出现,大量的克隆出现保证了重编程的高成功率。标尺:200μm。


102、细胞敲入基因信息

Nuwacell™ 科研级hiPSC-Luc-GFP细胞株Rosa 26 位点敲入基因信息示意图。




Nuwacell™ hPSC-多巴胺能神经前体细胞分化为成熟的中脑多巴胺能神经元(mDAN,复苏后DAY 33)的膜片钳测试结果。
选取符合形态特征的mDAN进行膜片钳测试,可检测到较稳定的2-10Hz的节律性自发放电。标尺:20μm。

Nuwacell™ ncLaminin511E8F支持多种多能干细胞(hPSC)的生长。 标尺:200μm。

上图分别为RC01001-A、RC01001-B、H9和NCB19001生长至DAY4细胞形态图示,Nuwacell™ hiPSC/hESC培养基-ncEpic培养。

103、细胞表面标志物检测

hiPSC/hESC 培养基-ncEpic 连续培养的hiPSC(P20)细胞表面标志物检测。
上图为流式细胞分析结果,浅灰色线条为同种抗体阴性对照,黑线为hiPSC细胞表面标志物抗体。

104、重编程后hiPSC克隆形态图示

外周血重编程初始阶段及扩增后的hiPSC克隆形态图示。

图A、B为重编程初始hiPSC克隆和扩增后的hiPSC克隆标尺:200μm

105、成熟hPSC-运动神经元荧光染色图示

Nuwacell™ hPSC-运动神经元前体细胞继续分化的成熟运动神经元(mMN,复苏后DAY 26)特异性标志物检测结果。
MAP2,βⅢ-Tubulin是mMN的特异性标志物,免疫荧光染色图示。标尺:50μm。

106、细胞形态与生长情况

连续培养的Nuwacell™ hiPSC-Luc-GFP细胞株(P30)细胞形态图示。荧光倒置显微镜图示。
图A、B为正常传代DAY 2细胞图示,C、D为正常传代DAY 3细胞图示。标尺:100μm。



108、分化过程中细胞形态图示

Nuwacell™ hPSC-间充质干细胞分化试剂盒分化过程中细胞形态图示。

图示分别为分化过程中DAY 1、3、8、14时的细胞形态。标尺:200μm。

不同铺底基质进行hiPSC单细胞传代细胞贴壁效果对比。6孔板,1000cells/孔hiPSC接种,统计DAY6生长克隆数。
Nuwacell™ ncLaminin511E8F显著优于其他铺底基质。

109、多能基因检测

hiPSC/hESC 培养基-ncEpic 连续培养的hiPSC(P20)多能性基因检测结果。
上图为qRT-PCR分析结果,OCT4与NANOG为细胞多能基因。

110、细胞GFP阳性率检测

连续培养的Nuwacell™ hiPSC-Luc-GFP细胞株(P30)GFP阳性率检测,GFP表达阳性。
上图为流式细胞分析结果,浅灰色线条为hiPSC阴性对照;黑线为hiPSC-Luc-GFP细胞株的GFP阳性率结果。

111、成熟运动神经元功能检测

Nuwacell™ hPSC-运动神经元前体细胞继续分化的成熟运动神经元(mMN,复苏后DAY 21)膜片钳电生理检测结果。
选取符合形态特征的神经元进行膜片钳测试,可检测到自发放电。标尺:50μm。

112、hPSC来源MSC细胞表面抗体检测

连续培养的hPSC-MSC(P3)细胞表面标志物检测:

CD73 + / CD90 + / CD105 +,CD14-/ CD34- / CD45- / CD79α-/ HLA-DR-。

(上图为流式细胞分析结果,浅灰色线条为同种抗体阴性对照,黑线为MSC细胞表面标志物抗体)

113、支持神经元生长细胞图示

Nuwacell™ ncLaminin511E8F铺底的连续培养的hPSC-运动神经元细胞图示。标尺:200μm。

114、基因组稳定性检测

hiPSC/hESC 培养基-ncEpic 连续培养的hiPSC(P20)基因组稳定性检测。核型:46,XX,分辨率:400带。

结果解释:G显带,计数20个分裂相,核型分析5个,未发现染色体数目或结构异常。



115、细胞荧光素酶(Luciferase)活性检测

Nuwacell™ hiPSC-Luc-GFP细胞株(P30)荧光素酶(Luciferase)活性检测结果。
上图为RLU(相对荧光强度)分析结果,其中阴性对照为普通hiPSC,hiPSC-Luc-GFP细胞株(P30)的荧光素酶(Luciferase)报告基因表达阳性。


116、hPSC来源MSC细胞三系分化潜能检测

连续培养的hPSC-MSC(P3)细胞三系分化功能实验。

A:脂肪分化(油红染色法)B:硬骨分化(茜素红染色法)C:软骨分化(阿利新兰染色法)。标尺:200μm。

117、细胞表面标志物检测

NuwacellhiPSC-Luc-GFP细胞株(P30)细胞表面标志物检测结果。

上图为流式细胞分析结果,其中浅灰色线条为同种抗体阴性对照,黑线为hiPSC细胞表面标志物抗体。

118、细胞多能基因检测

NuwacellhiPSC-Luc-GFP细胞株(P30)细胞多能基因检测结果。

上图为qRT-PCR分析结果,POU5F1与NANOG为细胞多能基因。

120、细胞染色体核型检测

NuwacellhiPSC-Luc-GFP细胞株(P30)细胞核型检测结果46,XY。

结果解释:G显带,计数20个分裂相,核型分析5个,未发现染色体数目或结构异常。

121、细胞分化潜能检测

NuwacellhiPSC-Luc-GFP细胞株(P30)细胞在免疫缺陷小鼠体内形成畸胎瘤。

E、F、G分别为神经组织(外胚层)、软骨组织(中胚层)、肠上皮组织(内胚层),成瘤时间8周。标尺:100μm。